γδT细胞是固有免疫系统中的效应细胞，这些细胞以 MHC 不受限制的方式发挥作用，使它们成为癌症免疫治疗的理想介质，近年来在过继性T细胞免疫疗法中越来越受欢迎。

T细胞有两种类型：αβT细胞和γδT细胞。前者表达T细胞受体（TCR），该受体包含α链和β链的异二聚体。后者表达包含γ链和δ链异二聚体的TCR，通常不表达共受体CD4和CD8，平均占人类外周血T细胞的4%。γδT细胞是MHC非依赖性的，并已被发现识别多种配体分子，如BTN家族蛋白（BTN2A1/BTN3A1和BTNL3/BTNL8）、MHC相关蛋白。γδT细胞通过其TCR识别这些分子，并表达先天受体，如NKG2D、Toll样受体（TLRs）和CD16。

γδT细胞在对抗感染性和肿瘤疾病中发挥重要作用，γδT细胞的免疫反应本质上偏向于I型免疫，I型免疫对感染细胞和肿瘤细胞产生强烈的细胞毒性作用（主要通过颗粒酶B和穿孔素），并导致IFN-γ产生增加。已有的研究表明，γδT细胞与癌症的良好预后呈正相关。这进一步支持了在癌症治疗中引入γδT细胞免疫疗法。

γδT细胞免疫治疗的开发策略

目前，制药公司在开发基于γδT细胞的抗癌疗法方面取得了很大进展。这些公司正在开发的临床前和临床阶段γδT细胞相关抗癌产品，设计的方法更加多样化。

制药行业大多采用了四大类基本策略。第一种是不经修饰的过继疗法，在该策略中，研究人员专注于利用效应γδT细胞的天然能力，并利用其不依赖MHC的性质，利用“现成”、安全使用和易于生产的特点。该方法包括利用Vδ2和Vδ1γδT细胞，重点优化扩增步骤，例如GammaDelta Therapeutics和PhosphoGam公司的产品。

第二种是修饰后的过继疗法。将经典的CAR结构引入γδT细胞是这一策略的起点，至少有九家公司使用了典型的CAR-T细胞技术。CAR-γδT细胞的靶标可分为两类：一类是在肿瘤中高表达的抗原，如GPC3和间皮素，另一类是受体，如NKG2DL和PD-L1。此外，许多公司都设计了改良的CAR。一种类似于TCR-T细胞技术的策略是将选定的抗肿瘤γδTCR移植到αβT细胞中，如Gadeta；或使用γδTCR结构域修饰CARs，例如Eureka Biotechnology公司。另一种策略结合了诱导多能干细胞（iPSC）和CAR技术来生产现成的CAR-γδT细胞，如Century Therapeutics和CytoMed Therapeutics生产的细胞。除了通过CAR修饰γδT细胞外，近年来，CRISPR的基因编辑也被IN8bio和Immatics等公司普遍使用。

第三是基于抗体的策略。ImCheck已使用抗BTN抗体在体内刺激Vγ9Vδ2 T细胞；在他们I/II期临床试验的早期分析中，ICT01（抗BTN3A抗体）在22名患者队列中显示出36%的疾病控制率。LAVA Therapeutics和Shattuck等几家公司使用双特异性抗体来激活γδT细胞并赋予其特异性。PureTech使用抗Vδ1抗体来阻断Vδ1γδT细胞。Acepodia将基于抗体的方法与过继细胞转移相结合，其中γδT细胞被肿瘤特异性抗体化学修饰。

最后是化学药物的使用和对肿瘤的修饰。美国基因技术公司旨在对肿瘤细胞进行基因修饰，以提高其PAgs水平，并原位激活Vγ9Vδ2 T细胞。AVM生物技术公司利用高浓度药物地塞米松磷酸盐的抗肿瘤作用涉及γδTCR+NKT细胞的激活。这种药物可以单独给药，也可以在CAR-T细胞治疗前作为预处理剂给药。

已有的γδT细胞免疫疗法临床结果

截至2022年10月，至少有28项γδT细胞免疫疗法研究（37个队列）正在临床中进行，所有这些研究都使用了Vγ9Vδ2 T细胞。这些研究共包括559名患者，其中有14个队列接受体内刺激，23个队列接受过继细胞转移。早期的研究通常是单药治疗，后期的研究开始将γδT淋巴细胞治疗与其他传统治疗相结合，通常是化疗。此外，81%的队列接受γδT细胞治疗是用于治疗实体癌，其中肺癌和肾癌是测试最多的肿瘤。

在307名可以测量肿瘤反应的患者（来自27个队列）中，无论策略如何，客观缓解率（ORR）为18%，疾病稳定（SD）率为31%。当对每种情况下的患者数量分别进行比较时，体内刺激与ACT以及ACT与ACT+之间显示出显著差异，而体内刺激与ACT+相似。然而，当详细检查结果时，发现对体内刺激治疗的最佳反应只有PR，最大的贡献来自将体内刺激与PD-1治疗相结合的研究。相比之下，在接受ACT+治疗的20名ORR患者中，有11人获得了CR。

此外，由于肿瘤类型会对治疗反应产生重大影响，因此在这组307名患者中比较了血液癌和实体癌患者的反应。其中，49名患者患有血液学癌症，而258名患者患有实体癌。血液学癌症患者中，37%（18名患者）实现响应（合并OR率30.1%），实体瘤患者中14%（36名患者）实现响应（合并OR率5.6%）

进行中的γδT细胞临床研究

截至2022年11月15日，至少有48项γδT细胞相关临床试验在ClinicalTrials上注册。在这些试验中，30项（63%）正在进行中，其中大多数是I期试验，旨在测试使用Vγ9Vδ2 T细胞治疗癌症的安全性和初步疗效。在所有这些试验的发起者中，中国和美国占81%。此外，这些注册试验也显示了在临床中应用γδT细胞策略的动态演变。

有趣的是，自2017年以来，γδT细胞临床试验的数量急剧增加。首个使用修饰γδT细胞（CAR-T）的临床试验于2016年在中国公布，并于2017年在中国开始。从那时起，又开始了10种CAR修饰的γδT细胞疗法，一项基因修饰的研究专注于增加γδT淋巴细胞的化学耐药性（NCT04165941），以及一项应用TCR-T细胞技术的研究，该技术将肿瘤细胞毒性γδTCR转化为αβT细胞（NCT04688853）。除了直接操纵T细胞外，Vγ9Vδ2 T细胞活化抗体的使用，无论是人源化抗BTN3A抗体（NCT04243499）还是工程化肿瘤-γδTCR双特异性抗体（NCT05369000，NCT04887259），在过去两年中都已成为一种新趋势。

在2017年之后的34项过继细胞转移试验中，30项明确细胞起源的临床试验中有20项使用了异基因γδT细胞。在观察治疗的癌症类型时，2017年之前，γδT细胞治疗致力于治疗实体肿瘤，但在启动CAR-γδT细胞治疗后，情况发生了变化。目前注册的CAR-γδT细胞治疗试验主要测试其在血液系统恶性肿瘤中的应用。白血病和肝癌分别是检测最多的血液癌和实体癌。

小结

回顾过去的γδT细胞免疫治疗的临床结果可以得出几个结论。首先，γδT细胞免疫疗法在临床上是一种安全的方法，无论是体内刺激、回输，还是自体或同种异体回输。一般来说，比2级更严重的不良事件与γδT细胞治疗没有直接关系，可以得到充分控制。其次，将γδT细胞疗法与其他常规疗法或体内刺激相结合显示出有希望的结果。研究表明放射治疗具有刺激性免疫调节作用。这种联合治疗产生的激活的肿瘤微环境可能有助于再注射的效应γδT细胞在肿瘤内有效运作。最后，新的方法，包括γδT细胞和免疫检查点抑制剂联合免疫治疗，双特异性抗体和 CAR-γδT 细胞都是有望克服目前治疗局限性的新策略。TME对γδT 细胞 免疫抑制作用的进一步研究，以及抗癌药物联合治疗、分子靶向药物、表观遗传药物、双特异性抗体以及 CAR-γδT 细胞的临床研究，将为未来γδT 细胞免疫治疗的临床应用奠定基础。

参考文献：

1. A close look at current γδ T-cell immunotherapy. Front Immunol. 2023 Mar 31;14:1140623